Investigadores de la Facultad de Odontología de la Universidad de Nueva York (NYU Dentistry), en colaboración con Rheonix, Inc. (Ithaca, NY), están desarrollando una novedosa prueba para detectar el virus del Zika que utiliza la saliva para identificar marcadores de diagnóstico del virus en una fracción del tiempo de las pruebas comerciales actuales.
La prueba, que se adaptó a partir de un modelo existente desarrollado por la NYU y Rheonix para pruebas rápidas del VIH, se describe en dos nuevas publicaciones que aparecen en PLOS ONEy el Revista de experimentos visualizados (JoVE).
Cómo se prueba el Zika
Los brotes de enfermedades infecciosas se producen cada vez con mayor frecuencia gracias a factores como la concentración de población y los viajes aéreos mundiales. Un brote de 2015 del virus del Zika en Brasil se propagó a otros países de América Central y del Sur, el Caribe y el sur de Estados Unidos, lo que llevó a la Organización Mundial de la Salud a declarar el Zika y su relación con defectos congénitos una emergencia de salud pública.
"El reciente brote del virus del Zika confirma que necesitamos un programa eficaz de vigilancia y diagnóstico para reducir el impacto de futuras enfermedades infecciosas emergentes", dijo Maite Sabalza, PhD, asociada postdoctoral en el Departamento de Ciencias Básicas y Biología Craneofacial de Odontología de la NYU y autora principal de los estudios en PLOS ONE y JoVE.
La identificación precoz de patógenos es fundamental para combatir la propagación de enfermedades infecciosas. Las pruebas suelen consistir en dos pasos distintos: uno para detectar los ácidos nucleicos (ARN o ADN) de un patógeno y otro para analizar la presencia de anticuerpos, las proteínas que produce el organismo en respuesta a los patógenos.
Las muestras de sangre se utilizan con mayor frecuencia para detectar el virus de Zika y suelen procesarse mediante una técnica de diagnóstico común denominada reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR). Pero la sangre puede no ser el mejor fluido: Mientras que el virus desaparece en la sangre una o dos semanas después de que una persona se infecte, puede persistir más tiempo en la saliva, el semen y la orina. Además, los anticuerpos pueden permanecer durante meses o años en esos fluidos corporales, por lo que es esencial para el diagnóstico detectar también anticuerpos después de la infección.
Con el apoyo financiero de los Institutos Nacionales de Salud, los investigadores de Odontología de la NYU están desarrollando una prueba rápida del Zika que combina ensayos de ácido nucleico y anticuerpos utilizando saliva, dado que el virus del Zika y los anticuerpos persisten en la saliva. Además, la prueba salival no es invasiva, rentabley más fácil de recoger que la sangre o la orina.
Resultados más rápidos
La nueva prueba también tiene el potencial de producir resultados en cuestión de minutos en lugar de horas o días. Las pruebas actuales de RT-PCR tardan unas tres horas y las de anticuerpos específicos, varias semanas. Los investigadores de la NYU están utilizando un método diferente llamado amplificación isotérmica, que puede detectar los ácidos nucleicos de un virus en tan solo 20 minutos, y pruebas de anticuerpos que pueden tardar menos de una hora utilizando antígenos específicos del Zika.
"Cuanto antes se pueda identificar un patógeno, antes se podrán tomar medidas para tratar y aislar a las personas. En caso de epidemia, se podría analizar a las personas antes de que suban a un avión. El futuro del control de seguridad en los aeropuertos puede que no consista en quitarse los zapatos, sino en escupir en un tubo", afirma Daniel Malamud, autor del estudio, Doctoradoprofesor de ciencias básicas en la NYU Dentistry.
Del VIH al Zika
El equipo de investigación se basa en su anterior trabajo de colaboración con Rheonix para desarrollar una prueba rápida de saliva para el VIH que puede detectar tanto el ARN viral como los anticuerpos.
"Cuando desarrollamos la prueba del VIH, sabíamos que podíamos utilizar el mismo modelo para cualquier enfermedad infecciosa. Todo lo que necesitamos saber es la secuencia del ácido nucleico y un antígeno para identificar anticuerpos específicos", dijo Malamud.
En PLOS ONELos investigadores describen cómo modificaron este modelo para utilizar marcadores que detectan las secuencias de ácido nucleico del Zika en lugar de las del VIH. A continuación, utilizaron un dispositivo portátil de amplificación isotérmica -que podría emplearse para pruebas en puntos de atención sanitaria- para identificar el ARN del Zika.
Tras demostrar que la prueba podía confirmar la presencia del virus utilizando tanto ARN de Zika purificado como saliva infectada por Zika, adaptaron la prueba al cartucho y la estación de trabajo Rheonix CARD®, lo que les permitió estimar la carga viral en muestras de saliva. Conocer la cantidad de virus presente es útil para comprender la gravedad de la enfermedad y las respuestas inmunitarias, especialmente entre las mujeres embarazadas y los fetos.
Los investigadores también identificaron antígenos específicos del Zika -que pueden utilizarse para detectar los anticuerpos específicos del Zika necesarios para las pruebas- utilizando un alta densidad péptido que describen en JoVE. Dado que el Zika puede confundirse fácilmente con otros virus como el dengue y el chikunguña, la identificación de antígenos específicos del Zika allana el camino para realizar pruebas de diagnóstico más precisas.
Los investigadores pueden combinar pruebas de ácidos nucleicos y anticuerpos en el cartucho Rheonix CARD® para un procesamiento automatizado y simultáneo, respaldado por pruebas de su eficacia. Los investigadores de la NYU y de todo el mundo siguen validando sus hallazgos en nuevos experimentos con saliva infectada por Zika.
"Con el objetivo de disponer rápidamente de diagnósticos eficaces, hemos desarrollado un protocolo genérico que no sólo puede utilizarse para detectar el virus del Zika, sino que puede adaptarse a la siguiente enfermedad infecciosa emergente o reemergente", afirmó Sabalza. El autor del estudio, Richard Montagna, PhD, FACB, Vicepresidente Senior de Asuntos Científicos y Clínicos de Rheonix, añadió: "Además de ser capaz de reaccionar muy rápidamente ante cualquier enfermedad infecciosa emergente o reemergente, nuestra plataforma de pruebas totalmente automatizada no requiere prácticamente ningún esfuerzo práctico y es muy adecuada para ser utilizada por personas con una formación mínima."
Fuente: https://www.dddmag.com/news/2018/02/researchers-adapt-hiv-test-developing-rapid-diagnostic-test-zika-virus
Añadir un comentario